Comparison of resazurin microtiter assay performance and BACTEC MGIT 960 in the susceptibility testing of Brazilian clinical isolates of Mycobacterium tuberculosis to four first-line drugs

We assessed the performance of REMA in comparison with BACTEC MGIT 960 in the susceptibility testing of 80 Mycobacterium tuberculosis clinical isolates from Clemente Ferreira Institute against four drugs. REMA proved to be a rapid and accurate method, providing excellent correlation with BACTEC MGIT 960, with the exception of results for the ethambutol drug.

Assessment of the quality of dna extracted by two techniques from Mycobacterium tuberculosis for fast molecular identification and genotyping

We report a comparative study of two DNA extraction techniques, thermolysis and chemical lysis (CTAB), for molecular identification and genotyping of M. tuberculosis. Forty DNA samples were subjected to PCR and the results demonstrated that with thermolysis it is possible to obtain useful data that enables fast identification and genotyping.

III Diretrizes para Tuberculose da Sociedade Brasileira de Pneumologia e Tisiologia / III Brazilian Thoracic Association Guidelines on Tuberculosis

Diariamente novos artigos científicos sobre tuberculose (TB) são publicados em todo mundo. No entanto, é difícil para o profissional sobrecarregado na rotina de trabalho acompanhar a literatura e discernir o que pode e deve ser aplicado na prática diária juntos aos pacientes com TB. A proposta das "III Diretrizes para TB da Sociedade Brasileira de Pneumologia e Tisiologia (SBPT)" é revisar de forma crítica o que existe de mais recente na literatura científica nacional e internacional sobre TB e apresentar aos profissionais da área de saúde as ferramentas mais atuais e úteis para o enfrentamento da TB no nosso país. As atuais "III Diretrizes para TB da SBPT" foram desenvolvidas pela Comissão de TB da SBPT e pelo Grupo de Trabalho para TB a partir do texto das "II Diretrizes para TB da SBPT" (2004). As bases de dados consultadas foram LILACS (SciELO) e PubMed (Medline). Os artigos citados foram avaliados para determinação do ...

New scientific articles about tuberculosis (TB) are published daily worldwide. However, it is difficult for health care workers, overloaded with work, to stay abreast of the latest research findings and to discern which information can and should be used in their daily practice on assisting TB patients. The purpose of the III Brazilian Thoracic Association (BTA) Guidelines on TB is to critically review the most recent national and international scientific information on TB, presenting an updated text with the most current and useful tools against TB to health care workers in our country. The III BTA Guidelines on TB have been developed by the BTA Committee on TB and the TB Work Group, based on the text of the II BTA Guidelines on TB (2004). We reviewed the following databases: LILACS (SciELO) and PubMed (Medline). The level of evidence of the cited articles was determined, and 24 recommendations ...

Avaliação de uma sonda genética (Sistema Accuprobe, Gen Probe®) para identificação de organismos do complexo Mycobacterium tuberculosis, em comparação com métodos tradicionais de caracterização / Evaluation of a genetic probe (Gen-Probe Accuprobe® system) in comparison to traditional methods for identifying members of the Mycobacterium tuberculosis complex

INTRODUÇÃO: O aparecimento da co-infecção tuberculose/síndrome da imunodeficiência adquirida, o aumento de doenças por micobactérias não tuberculosas e as confusões que estas podem ter com as emergentes cepas multirresistentes exigem respostas laboratoriais mais rápidas e de melhor rendimento, não só com isolamento das micobactérias, mas também com a sua identificação. OBJETIVO: Estudo comparativo entre uma nova ferramenta de identificação molecular com sonda genética baseada na unidade 16S do gene rDNA do Mycobacterium tuberculosis (Accuprobe Gen Probe®, Gen Probe Inc.) e a metodologia clássica. MÉTODO: Foram selecionados 55 isolados do gênero Mycobacterium, mantidos em bacterioteca, obtidos de escarros de pacientes de uma unidade de referência para tuberculose. Foram feitos repiques em três tubos: um destinado à identificação genética, outro para realização dos testes clássicos (produção e acumulação da niacina, e crescimento em meio de Lowenstein-Jensen com agentes inibidores - ácido p-nitrobenzóico e hidrazida do ácido tiofeno-2-carboxílico), e outro reserva. RESULTADOS: A sonda identificou 51 amostras do complexo M. tuberculosis (uma associada ao M. kansasii) e 4 como micobactérias não tuberculosas, posteriormente identificadas como M. kansasii (3) e M. avium (1). Os métodos tradicionais identificaram 47 amostras como do complexo M. tuberculosis, 4 com perfil de micobactérias não tuberculosas (concordante com o obtido pela sondagem genética) e 4 provas inconclusivas, uma delas exatamente a que associava duas espécies de micobactérias. CONCLUSÃO: Os benefícios da técnica de biologia molecular justificam sua implantação e uso rotineiro, associado aos métodos clássicos, numa unidade com alta demanda e que atenda casos de tuberculose de alta complexidade.

Rendimento da cultura de escarro na comparação de um sistema de diagnóstico automatizado com o meio de Lowenstein-Jensen para o diagnóstico da tuberculose pulmonar / Sputum culture yield: comparing an automated diagnostic system to Lõwenstein-Jensen medium in the diagnosis of pulmonary tuberculosis

INTRODUÇÃO: A tuberculose permanece um problema de saúde pública mundial. OBJETIVO: Avaliar um sistema de diagnóstico automatizado de tuberculose, comparando-o com baciloscopia e cultura em meio de Lowenstein-Jensen. MÉTODO: Estudo comparativo entre os resultados obtidos no sistema automatizado, baciloscopia do escarro e em meio de Lowenstein-Jensen, em 844 amostras de escarro de setembro a dezembro de 1999, em centro de referência para tuberculose em São Paulo (SP). RESULTADOS: Das 844 amostras, 27,1 por cento mostraram-se positivas para bacilo álcool-acidorresistente e 72,9 por cento negativas. Nos cultivos em Lowenstein-Jensen, 34,7 por cento foram positivas e 63 por cento negativas; no sistema automatizado, 37,1 por cento foram positivas e 56,9 por cento negativas. Observou-se sensibilidade de 98,1 por cento e 91.9 por cento no sistema automatizado e no Lowenstein-Jensen, respectivamente. A especificidade e o valor preditivo positivo foram de 100 por cento nos dois métodos. O valor preditivo negativo foi de 98,9 por cento no sistema automatizado e de 95,5 por cento no Lowenstein-Jensen. A acurácia foi de 99,3 por cento no sistema automatizado e 97 por cento no Lowenstein-Jensen e o Kappa de 0,99 no sistema automatizado e 0,94 no Lowenstein-Jensen. O tempo médio de detecção das micobactérias no sistema automatizado (10,5 dias) apresentou diferença estatística significativa quando comparado com o método de Lowenstein-Jensen (34,7 dias). CONCLUSÃO: O rendimento da cultura com o sistema automatizado apresentou diferença estatística significativa quando comparado com o meio de Lowenstein-Jensen. O tempo médio de detecção das micobactérias foi significativamente reduzido no sistema automatizado. O rendimento do sistema automatizado justifica sua utilização em unidade de referência ambulatorial para a tuberculose em São Paulo.

Aspectos epidemiológicos da tuberculose multirresistente em serviço de referência na cidade de São Paulo / Epidemiological features of multidrug-resistant tuberculosis in a reference service in São Paulo city

Com o objetivo de estudar algumas características epidemiológicas dos portadores de tuberculose pulmonar multirresistente e suas influências sobre o controle e o tratamento, foi avaliada uma coorte de 4 anos de pacientes selecionados pela recuperaçäo do Mycobacterium tuberculosis no escarro, resistência à rifampicina, isoniazida e mais uma terceira droga usual ou falência do esquema de reserva, matriculados em uma referência na cidade de São Paulo. As variáveis estudadas foram: sexo e idade, tipo de multirresistência, contágio, condições associadas, perfil de resistência às drogas usuais e distribuiçäo das lesöes na radiologia convencional. Revistos 182 pacientes, 112 (61,5 por cento) masculinos, com idade variando entre 16 e 64 anos (35,7±6,8). Com base na história terapêutica foram discriminados os seguintes tipos: MR-primária (com teste de sensibilidade inicial), 11 (6 por cento), MR-pós-primária (irregularidade no tratamento anterior), 134 (74 por cento) e MR-indeterminada (falência após uso regular informado dos esquemas usuais), 37 (20 por cento). Contágio presente em 41 de 170 pacientes, predominando o intradomiciliar sobre o institucional. Identificados 4 surtos familiares e nenhum institucional. O abandono (45 por cento) foi a mais freqüente condiçäo associada, seguido do etilismo (27 por cento), falência seqüencial aos esquemas de retratamento (23 por cento), contágio com multirresistência (15 por cento), reações adversas às drogas (6 por cento), HIV-positivo (4 por cento) e diabetes (3 por cento). Resistência à rifampiina+isoniazida em 100 por cento, 83 por cento à estreptomicina e 47 por cento ao etambutol. Todos com cavidades no Rx de tórax convencional, unilaterais em 35 (19 por cento). Discutem-se os achados e apresentam-se sugestöes

Diagnóstico da tuberculose pleural pela ADA, isolada ou combinada a outras variáveis, inclusive em HIV-positivos / Diagnosis of pleural tuberculosis by ADA, isolated or combined with other variables, incluing in HIV positive patients

A tuberculose pleural (TBP) é a de maior incidência entre as formas extrapulmonares e, provavelmente, o diagnóstico mais freqüente dos derrames pleurais observados no Brasil, justificando os estudos para se estabelecerem métodos diagnósticos rápidos e acessíveis. Neste trabalho foi dimensionado o volume da atividade da adenosina deaminase (ADA), isolada ou combinada a outras variáveis de fácil acesso, baixo custo e simples obtenção no diagnóstico da TBP, inclusive em infectados pelo HIV. Trata-se de estudo retrospectivo e seqüencial, avaliando os resultados de punção pleural diagnóstico realizada em dois tempos (toracocentese e biópsia pleural). Pleuris não-tuberculoso (PNT) foi diagnosticado quando presentes três parâmetros entre história clínica, radiologia, bioquímica e citologia do líqüido pleural, anatomopatologia e outros. As três variáveis selecionadas para avaliação combinada com a ADA foram: concentração de proteínas (CPT), taxa de linfócitos (TLT) no líquido pleural e idade dos doentes (IDD). Os resultados foram analisados estatisticamente pelos testes do qui-quadrado (X2) e t de Student. Os níveis de corte foram definidos pela maximização da sensibilidade e especificidade por meio da curva ROC, avaliados os valores diagnósticos e a contribuição independente no diagnóstico etiológico da TBP pela regressão logística múltipla das quatro variáveis. Foram estudados 417 pacientes maiores de 14 anos portadores de derrame pleural (excluídos os empiemas) matriculados no Instituto Clemente Ferreira (ICF) em São Paulo no período de 1990 a 1994. Destes pacientes 268 estavam com TBP, dos quais 47 HIV-negativos e 21 positivos e 149 com PNT, sendo 33 HIV-negativos e 8 positivos. Os valores médios das variáveis analisadas apresentaram diferenças estatisticamente significantes entre os pacientes com TBP e PNT. Os níveis de corte estabelecidos pela curva ROC foram de > 30 U/L para a ADA, de > 4,5 g/dL para a CPT, de > 90 por cento para a TLF e < 45 anos para a IDD. A sensibilidade, a especificidade o valor preditivo positivo, o valor preditivo negativo e a acurácia encontrados foram, respectivamente: para a ADA = 94, 95, 97, 89 e 94 por cento; para a CPT = 80, 64, 80, 64 e 74 por cento para a TLF = 73, 67, 80, 58 e 71 por cento e para a IDD = 77, 69, 77, 69 e 75 por cento. No modelo de regressão logística múltipla a ADA > 30 U/L se associou ao diagnóstico etiológico da TBP com uma razão de chance de 184 vezes...

Tuberculose multirresistente (TBMR): aspectos clínicos-laboratoriais, epidemiológicos e terapêuticos / Multiresistant tuberculosis (MRTB): clinical, laboratorial, epidemiological, and therapeutic aspects

Objetivos: Avaliar aspectos clínico-laboratoriais, epidemiológicos e terapêuticos de pacientes portadores de tuberculose multirresistente (TBMR). Pacientes e métodos: estudo prospectivo, näo randomizado, de pacientes portadores de TBMR, caracterizados pela falência aos E-1 e E-3 do Ministério da Saúde e resistência à R e H, entre janeiro de 1993 e dezembro de 1994. Foram avaliados aspectos clínico-laboratoriais como idade, sexo, grupo étnico, tempo de doença, ocorrência de cavidades na radiologia convencional, resistência às drogas pelo método indireto segundo os critérios proporcionais de Canetti et al.; epidemiológicos como os fatores preditores de riscos para a multirresistência e os resultados do tratamento. este constou de dois regimes quimioterápicos alternativos, associando um aminoglicosídeo, amicacina (grupo A) ou a S se sensível (grupo B), a ofloxacina, a clofazimina, além de outras drogas como a tiacetazona, o E ou a Z, de acordo com a sensibilidade ou uso limitado anterior, por um mínimo de 12 meses. Doentes com lesöes radiológicas unilaterais, possibilidades funcionais e que aceitaram a indicaçäo foram submetidosss a cirurgia (grupo C). O tratamento foi ambulatorial, auto-administrado ou sob supervisäo indireta, com a internaçäo admitida por razöes clínicas, por tempo limitado ou quando indicada a cirurgia. Excluídos os doentes com tratamento alternativo anterior, os infectados pelo HIV, as grávidas e os portadores de insuficiência renal. A avaliaçäo estendeu-se até 12 meses após o término do tratamento. Resultados: Estudados 70 pacientes, idade média de 37 anos, 42 do sexo masculino, 44 brancos e 26 näo brancos (2 amarelos), tempo médio de doença de 4 aanos e lesöes cavitárias bilaterais em 55(78,6por cento). Resistência a duas drogas em 28,6 por cento, a três em 51,4 por cento e a quatro em 20 por cento. O fator preditor de risco para a TBMR mais freqüente foi o abandono (54,3 por cento), seguido da recidiva após cura com E-1 e falência no retratamento (14,3por cento), intolerânncia às drogas (11,4 por cento), contato com TBMR (8,6 por cento). Em 11 por cento näo foi possível determinar o fator preditor de risco, sendo a multirresistência adquirida considerada em 80 por cento e a primária, em apenas 8,6 por cento dos casos. A cura foi observada em 25 do grupo A(N=39) ee 3 do C (N=7). Somente 2 abandonaram o tratamento (A) e apenas 2 morreram durante o tratamento...

Atividade da adenosina deaminase(ADA) isolada e combinada a outras variáveis no diagnóstico da tuberculose pleural e sua aplicabilidade em infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH) / Activity of adenosine deaminase(ADA) isolated and combination a others variables in pleural tuberculosis diagnosis and their aplicability in contaminate by immunodeficiency human virus(VIH)

OBJETIVOS: Dimensionar o valor da atividade da adenosina deaminase (ADA), isolada e em combinação a outras variáveis de fácil acesso, baixo custo e simples obtenção no diagnóstico etiológico da tuberculose pleural (TBP) e sua aplicabilidade no diagnóstico da TBP em pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH). CASUÍSTICA E MÉTODOS: Estudo retrospectivo de pacientes maiores de 14 anos, portadores de derrame pleural não empiemático, submetidos a toracocentese e biópsia pleural por agulha, com a ADA dosada pelo método de Giusti, matriculados consecutivamente no Instituto Clemente Ferreira - São Paulo, no período de 1990 a 1994. O diagnóstico da TBP foi estabelecido pela recuperação do bacilo em cultura do escarro, líquido ou fragmento pleural elou achado de granuloma sugestivo ou típico de tuberculose na anatomopatologia do fragmento. O derrame não tuberculoso (DNT) diagnosticado quando presente três parâmetros entre a história clínica, radiologia, bioquímica e citologia do líquido pleural, anatomopatologia, outros exames complementares e evolução do tratamento. A sorologia anti-VIH foi realizada em uma amostra dos pacientes pelos métodos de ELISA e "WestenBlots". Três variáveis, que correspondiam aos objetivos do estudo, foram selecionadas para avaliação combinada com a ADA: a concentração de proteínas (CPT) e a taxa de linfócitos (TLF) no líquido pleural e a idade (IDD). Os resultados foram analisados estatisticamente por testes do qui-quadrado e "student", os níveis de corte definidos pela maximização da sensibilidade e especificidade através da curva ROC, avaliados os valores diagnósticos e a contribuição independente no, diagnóstico etiológico da TBP pela regressão logística múltipla das quatro variáveis. RESULTADOS: Foram revistos 417 pacientes, 268 com TBP (47 VIH-negativos e 21 positivos) e 149 com DNT (33 VIH negativos e 8 positivos). Os valores médios das variáveis analisadas apresentaram diferenças estatisticamente significantes entre os pacientes com...

Atividade da adenosina deaminase (ADA) isolada e combinada a outras variáveis no diagnóstico da tuberculose pleural e sua aplicabilidade em infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH) / Activity of the adenosine deaminase isolated and combied an others variables in the pleural tuberculosis diagnosis and its applicability in infecteds by human immunodeficiency virus

Dimensionar o valor da atividade da adenosina deaminase (ADA), isolada e em combinaçäo a outras variáveis de fácil acesso, baixo custo e simples obtençäo no diagnóstico etiológico da tuberculose pleural (TBP) e sua aplicabilidade no diagnóstico da TBP em pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH). Estudo retrospectivo de pacientes maiores de 14 anos, portadores de derrame pleural näo empiemático, submetidos a toracocentese e biópsia pleural por agulha, com a ADA dosada pelo método de Giusti, matriculados consecutivamente no Instituto Clemente Ferreira - Säo Paulo, no período de 1990 a 1994. O diagnóstico da TBP foi estabelecido pela recuperaçäo do bacilo em cultura do escarro, líquido ou fragmento pleural e/ou achado de granuloma sugestivo ou típico de tuberculose na anatomopatologia do fragmento. O derrame näo tuberculoso (DNT) diagnosticado quando presente três parâmetros entre a história clínica, radiologia, bioquímica e citologia do líquido pleural, anatomopatologia, outros exames complementares e evoluçäo do tratamento. A sorologia anti-VIH foi realizada em uma amostra dos pacientes pelos métodos de ELISA e "Westen-Blots". Três variáveis, que correspondiam aos objetivos do estudo, foram selecionadas para avaliaçäo combinada com a ADA: a concentraçäo de proteínas (CPT) e a taxa de linfócitos (TLF) no líquido pleural e a idade (IDD). Os resultados foram analisados estatisticamente por testes do qui-quadrado e "student", os níveis de corte definidos pela maximizaçäo da sensibilidade e especificidade através da curva ROC, avaliados os valores diagnósticos e a contribuiçäo independente no diagnóstico etiológico da TBP pela regressäo logística múltipla das quatro variáveis.

Resistência primária do "M. tuberculosis" num serviço ambulatorial de referência em Säo Paulo: evoluçäo por três décadas e comparaçäo com outros estudos nacionais / Primary resistance to Mycobacterium tuberculosis in an ambulatorial reference service in Säo Paulo city: evolution for three decades and comparison with other national studies

Estudos sobre a resistência primária (RP) do Mycobacterium tuberculosis permitem dimensionar as possibilidades dos esquemas de tratamento em uso. Este trabalho revê a RP na década de 80 e como evoluiu desde a década de 60 e 70, em clientes do Instituto Clemente Ferreira (ICF), referência ambulatorial para TB na Grande Säo Paulo. Pacientes e métodos - O perfil da RP do M. tuberculosis às principais drogas em uso no páis foi revisto em cepas isoladas no escarro de pacientes portadores de TB pulmonar sem tratamento anterior, maiores de 14 anos, excluídos os HIV-positivos, matriculados no ICF no triênio de 87, 88 e 89. Para acompanhar a evoluçäo, os achados foram comparados à RP de 406 doentes revistos nos anos de 64, 65 e 66 e de 387 de 76, 77 e 78, destacados de estudos anteriores realizados no ICF com a mesma metodologia. Resultados - Do total de 458 pacientes revistos nos anos de 87/88/89, 34 (7,4 por cento) apresentavam RP, sendo a uma única droga em 27 (5,9 por cento) e múltipla em 7 (1,5 por cento), esta assim distribuída: 4 a RH, 1 à HS,1 à SE e 1 à RHS. A RP global acumulada por droga foi de 3,9 por cento para a H, 3,7 por cento para a S, 1,1 por cento para a R e 0,4 por cento para o E. Comparando estes achados aos da décadas de 60 e 70, observa-se um decréscimo progressivo da RP. A RP total caiu de 17,2 por cento (70/406) em 60, para 9,6 por cento (37/387) em 70 e 7,4 por cento (34/458) em 80 (p < o,oo1). A reduçäo foi mais expressiva de 60 para 70 (p = 0,002) do que de 70 para 80 (p = 0,32). Esta reduçäo foi significante (p < 0,001) tanto para a RP a uma única droga, que caiu de 12,6 por cento (51/406) para 8,3 por cento (32/387) e 5,6 por cento (27/458) como para a RP múltipla, que passou de 4,7 por cento (19/406) para 1,3 por cento (7/458). Quanto a RP global acumulada, foi significante o decréscimo para as drogas tradicionais, H e S, que caiu de 11,1 por cento e 10,8 por cento na década de 60, para 6,5 por cento e 5,4 por cento na de 70, para 3,9 por cento e 3,7 por cento na década de 80, respectivamente (p < 0,001). A RP global acumulada à R e E, testadas apenas em 70 e 80, foi baixa, com aumento estatisticamente significante para a R, que passou de 0,3 para 1,1 por cento (p = 0,02). Os estudos de cada década foram confrontados a estudos semelhantes em outros estados, sendo discutidos os achados.